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PRPは、採取した末梢血を2回の遠心分離操作することによって調製されます。1回の遠心分離によって調整することも可能ですが、一般的には、より精製度を増すために2回法が多く用いられています。

まず、患者末梢血に抗凝固薬としてクエン酸ナトリウムを加え、1回目の遠心分離により抹消血を赤血球層と血漿層とに分離させます。血小板はこの2つの層の間に集められます。慎重に血漿層と血小板層のみを取り出し、これを2回目の遠心分離にかけ、血漿層と血小板層とに分離させます。分離した高濃度の血小板と少量の血漿とを混和してPRPが精製されます。
しかし、このままの状態ではPRPを再生治療に用いることはできません。PRPを凝固させなければならないわけです。PRPを凝固させるために、多くの調製方法では、ウシやヒトのトロンビンと塩化カルシウムを混合して使用しています。

しかし、異種動物や他家由来材料をPRP凝固のために使用することは、感染や副作用などの危険性があり、実際に患者からの同意を得ることは困難です。この問題を解決する方法として、患者末梢血から自己トロンビンを調製する方法があります。

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